二、儀器藥品

剪刀                                   分析天平

稱量皿                                 烘箱

刀片                                   金屬模板

紗布                                   錫紙

三氯-乙酸

三、實(shí)驗(yàn)步驟

1．選擇測(cè)定樣品

在田間選擇有代表性的植株葉片（如葉片在植株上的部位、葉齡、受光條件等）20片，用小紙牌編號(hào)。

2．葉子基部處理

為了不使選定葉片中光合作用產(chǎn)物往外運(yùn)而影響測(cè)定效果的準(zhǔn)確性可采用下列方法進(jìn)行處理。

（1）可將葉片輸導(dǎo)系統(tǒng)的韌皮部破壞。如棉花等雙子葉植物的葉片可用刀片將葉柄的韌皮部環(huán)割0.5厘米左右寬。

（2）如小麥、水稻等單子葉植物，由于韌皮部和木質(zhì)部難以分開處理，可用剛在開水中浸過(guò)的紗布或棉花做成夾子在葉子基部燙傷一小段即可（一般90℃以上的開水燙20秒）。

（3）由于棉花葉柄木質(zhì)化程度低，葉柄易受折斷。用開水燙又難以掌握燙傷的程度，往往不是燙得不夠便是燙得過(guò)重使葉片下垂、改變了葉片的角度。因此可改用化學(xué)方法來(lái)處理，選用適量濃度的三氯-乙酸點(diǎn)涂葉柄以阻止光合產(chǎn)物的輸出。三氯-乙酸是一種強(qiáng)烈的蛋白質(zhì)沉淀劑，滲入葉柄后可將篩管生活細(xì)胞殺死而起到阻止有機(jī)物質(zhì)運(yùn)輸?shù)淖饔?。三?乙酸的濃度視葉柄幼嫩的程度而異，以能顯著灼傷葉柄而又不影響水分供應(yīng)，不改變?nèi)~片角度為宜。一般使用5%的三氯-乙酸。為了使?fàn)C后或環(huán)割等處理后的葉片不致下垂影響葉片的自然生長(zhǎng)角度可用錫紙或塑料管包圍之，使葉片保持原來(lái)生長(zhǎng)角度。

3．剪取樣品

葉基部處理完畢后，即可剪取樣品，記錄時(shí)間，開始進(jìn)行光合作用測(cè)定。一般按編號(hào)次序分別剪下對(duì)稱葉片的一半（主脈不剪下），按編號(hào)順序夾于濕潤(rùn)的紗布中，貯于暗處。過(guò)四、五小時(shí)后，再依次剪下另外半葉，同樣按編號(hào)夾于濕潤(rùn)紗布中，兩次剪葉的速度應(yīng)盡量保持一致，使各葉片經(jīng)歷相等的光照時(shí)間。

4．稱重比較

將各同號(hào)葉片兩半按對(duì)應(yīng)部位迭在一起，在無(wú)粗葉脈處用已知面積的打孔器取小圓葉片數(shù)個(gè)分別置于光照及暗中的兩個(gè)稱量皿中，在80-90℃下烘至恒重（約5小時(shí)），在分析天平上稱重比較。

5．計(jì)算結(jié)果

葉片干重差之總和（以mg表示）除以葉片面積（換成dm2，1dm2=100cm2）及光照時(shí)數(shù)，即得光合作用強(qiáng)度，以干物質(zhì)mg/dm2·h表示之。計(jì)算公式如下：

由于葉片內(nèi)貯存的光合產(chǎn)物一般為蔗糖和淀粉等，可將干物質(zhì)重量乘系數(shù)1.5，得二氧化碳同化量，單位為CO2mg/dm2·h。